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如何正確選擇液相色譜柱
2012-10-17 [3063]

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一、液相色譜柱選擇方法|點(diǎn)擊這里瀏覽本公司提供的二手液相 島津液相

  1.確定分離目的確定你的應用是否要求高分離度、短分析時(shí)間、高靈敏度、長(cháng)柱壽命,低的操縱本錢(qián)等等。

  2.評估分析物的化學(xué)性質(zhì)評估分析物的化學(xué)性質(zhì)..諸如化學(xué)結構、溶解性、穩定性等等。

  3.選擇合適的色譜柱了解色譜填料的物理和化學(xué)性質(zhì)。

  二、液相色譜柱選擇方法|點(diǎn)擊這里瀏覽本公司提供的二手液相 島津液相


  A填料基質(zhì)

  1.硅膠基質(zhì):純度高本錢(qián)低,強度大,化學(xué)修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩定,但經(jīng)過(guò)特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩定在pH1.5-10。

  2.聚合物基質(zhì):應用pH值范圍寬,溫度穩定(高溫可以達到80度以上),機械強度小。

  B顆粒外形

  大多現代HPLC填料都是球形顆粒,但有時(shí)是不規則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩定性以及較長(cháng)的柱壽命在使用高粘度的活動(dòng)相時(shí);不規則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價(jià)格。

  C顆粒粒徑

  粒徑越小柱效越高、分離度越高,但同時(shí)會(huì )導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。

  D含碳量

  含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時(shí)間,用于要求高分離度的復雜樣品;低含碳量分析時(shí)間短、展現不同的選擇性,用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。

  E孔徑和比表面積

  HPLC吸附介質(zhì)是多孔的顆粒,盡大多數的反應表面于孔內。因此,分子必須進(jìn)進(jìn)孔內才能被吸附和分離。

  孔徑和比表面積是相輔相成的兩個(gè)概念??讖叫”缺砻娣e大,反之亦然。比表面積大,增加樣品與鍵合相之間的反應,增加保存,上樣量和復雜成分的分離度;比表面積小,平衡時(shí)間快,適合梯度分析。

  F孔容和機械強度

  孔容,又稱(chēng)“孔體積”。指單位顆粒的空隙體積大小。它能很好的反應填料的機械強度??左w積大的填料相對孔體積小的填料機械強度要略弱??左w積為1.5mL/g或更小的填料大多用于HPLC分離,而孔體積大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色譜和低壓色譜。

  G封端封端

  封端能夠降低極性堿性化合物由于與裸露的硅醇基相互作用而產(chǎn)生的拖尾峰。不封端鍵合相相對封端鍵合相會(huì )產(chǎn)生不同的選擇性,尤其是極性樣品。


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